科學(xué)家研發(fā)番茄褐色皺果病毒試紙條 10秒測出西紅柿病毒

發(fā)布時間:2021-10-14 13:26:45  |  來源:科技日報  

將一片西紅柿葉子在滴管里擠出汁液,并適當(dāng)加水稀釋,然后輕輕放入一片試紙條,大約10秒之后,該紙條上清晰地出現(xiàn)了兩道暗紅色的橫條,這是該葉子感染了番茄褐色皺果病毒(tomatobrownrugosefruitvirus,簡稱ToBRFV)的標(biāo)志。

這一幕是在山東農(nóng)業(yè)大學(xué)植物病毒學(xué)研究室發(fā)生的。近日,科技日報記者來到該實(shí)驗(yàn)室時,實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人、植物病毒學(xué)專家李向東教授告訴記者:“這是我們實(shí)驗(yàn)室剛剛制備的番茄褐色皺果病毒試紙條。相對于其它檢測手段,它靈敏度高、特異性強(qiáng)、使用方便、操作簡單,非常適合田間大批量樣品檢測,對病毒的精準(zhǔn)監(jiān)測及早期預(yù)警有重要作用。”

番茄褐色皺果病毒是一種新發(fā)病毒,可通過種子、接觸以及熊蜂傳播,嚴(yán)重威脅番茄的安全生產(chǎn)。ToBRFV首先報道于約旦、以色列,隨后相繼在美洲、歐洲、非洲等國家出現(xiàn),引起國際上廣泛重視,多個國家將其列入檢疫對象。

今年4月9日,我國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部和海關(guān)總署聯(lián)合發(fā)布的《中華人民共和國進(jìn)境植物檢疫性有害生物名錄》也將ToBRFV列為檢疫對象。

快速鑒定及早期預(yù)警對ToBRFV的防治十分關(guān)鍵。目前的ToBRFV檢測方法包括多重PCR、熒光定量等,均需要精密儀器或?qū)I(yè)的操作人員。而李向東實(shí)驗(yàn)室研制的膠體金免疫試紙條操作簡單,可在幾秒或者幾分鐘內(nèi)通過肉眼觀察進(jìn)行判斷,對于田間檢測十分適用。

據(jù)李向東介紹,他們實(shí)驗(yàn)室以ToBRFV粒子為免疫原,通過雜交瘤技術(shù)制備了17株抗ToBRFV的單抗,將2個單抗分別固定于膠體金墊和硝酸纖維素膜上進(jìn)行組合,制備膠體金試紙條,獲得272個配對組合。通過特異性測定,篩選到一組配對抗體制備的試紙條。試紙條可從稀釋12800倍的番茄葉片病汁液中(含約8微克番茄葉片)檢測到ToBRFV,快速而且靈敏,而與其它同屬煙草花葉病毒屬、氨基酸一致率超過85%、同樣侵染番茄的番茄斑駁花葉病毒、番茄花葉病毒等毫無反應(yīng)。

“我們同時在辣椒上做了實(shí)驗(yàn),結(jié)果同樣理想。目前,該成果已經(jīng)申請國家發(fā)明專利,并被山東、河北、河南、江蘇、安徽等地農(nóng)技推廣部門和企業(yè)試用。”李向東說。(王延斌 翟榮惠)

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